PREPARACIÓN DE TEJIDOS

El material humano puede provenir de tres fuentes:

*Las Autopsias: son las piezas que se obtienen de un cadáver.

*las biopsias: son trozos de tejido que se obtienen de un sujeto con vida con el objeto de estudiarlos al microscopio.

*piezas operadas: los tejidos que han sido extraídos de las intervenciones quirúrgicas, generalmente tumores u órganos inflamados

Los pasos son los siguientes:

1º)Fijación: Es el tratamiento del tejido con sustancias químicas, que mantiene las estructuras al estimular la formación de enlaces. Los agentes más usados son: Formaldehido al 5%, Formol al 10% o Formalina

2º) Deshidratación: una gran parte del tejido está constituida por agua, se aplica una serie gradual de soluciones, por ejemplo, Alcohol Etílico o Acetona. Iniciando con alcohol al 50 %, luego con una solución de 60%, 70%, 80%, 90%, 96% y alcanzando de manera lenta el  100 % para eliminar el agua.

3º ) Aclaramiento: La sustancia comúnmente utilizada es el Xileno o Xilol, solo es soluble en alcohol al 100%. Se llama aclaramiento ya que el tejido se torna transparente o claro en el xileno. También se pueden utilizar Tolueno, Benzol o Cloroformo como medios de aclaramiento.

4º) Inclusión: los tejidos tienen que ser incluidos y envueltos por una sustancia de consistencia firme. Para que este se endurezca. Las sustancia más usada para es la parafina.

5º)Corte y Montaje: los cortes se colocan sobre láminas portaobjetos cubiertos previamente con capa de albúmina o gelatina estos cortes son sumamente delgados cuyo grosor varía entre 5 – 10 micrómetros

Los cortes se colocan sobre portaobjetos a los que se les ha agregado una pequeña cantidad de Albúmina, la cual actúa como adhesivo.

6º)Tincion:  La parafina se elimina en un solvente orgánico, de nuevo se incluyen en Xilol, y la muestra se rehidrata. Ya rehidratado se TIÑE EL TEJIDO. Los colorantes más utilizados son la HEMATOXILINA Y la EOSINA.

Los colorantes pueden agruparse en 3 clases:

Colorantes que diferencian los componentes ácidos y básicos de la célula.

Colorantes especializados que distinguen los componentes fibrosos de la matriz extracelular.

Sales metálicas que se precipitan en los tejidos y forman depósitos de metales con ellos.

Algunos colorantes acidos y basicos
Colorante basico	Color
Verde de metileno	Verde
Azul de metileno	Azul
Pironina G	Rojo
Azul de toluidina	Azul
Colorantes acidos
Fuecsina acida	Rojo
Azul de anilina	Azul
Eosina	Rojo
Naranja G	Naranja

Colorantes

Reactivo	Resultado
Hematoxilina	Azul : núcleo, citoplasma, matriz de cartílago
Eosina	Rosa: fibras de colágeno
Tricròmica de Masson	Azul oscuro: núcleo Azul claro: mucinogeno
Colorante  de Orcenia	Pardo: fibras elásticas
Colorante Weigert	Azul: fibras elásticas
Tinción Argenica	Negro: fibras reticulares

Redactado por: Maritza